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【技術分享】沙門氏菌血清分型技術介紹

2022-04-29 08:59瀏覽量:1280

沙門氏菌(Salmonella)是一種常見的食源性致病菌,寄生在人類和動物腸道中,根據Kauffman-White(K-W)血清型分型方法,基于沙門氏菌菌體抗原及鞭毛抗原的差異,可分為2579種沙門氏菌血清型[1]。


其中部分血清型,如腸炎沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌等,能夠使宿主產生嘔吐、腹瀉等多種食源性疾病癥狀[2,3]。據估計,每年因沙門氏菌感染而引起的食物中毒事件占食源性疾病的70%~80%[4]。


對此,世衛組織(WHO)在2000年創立了全球范圍內的沙門氏菌監測網,在世界范圍內,對沙門氏菌等食源性致病菌進行監測和防控[5]。沙門氏菌血清分型在常規監測、病原學檢測及菌株溯源中有著重要作用,具有重要的公共衛生學意義。


#針對沙門氏菌血清分型,有以下幾種方法#


傳統血清凝集法

噬菌體分型法

聚合酶鏈式反應(Polymerase chain reaction,PCR)技術

脈沖場凝膠電泳(Pulsed field gel electrophoresis,PFGE)

全基因組測序等。


聚合酶鏈式反應(Polymerase chain reaction,PCR)技術目前已被廣泛應用在微生物鑒定中,人們通過對沙門氏菌不同血清型的基因序列分析,找出不同血清型的特異性編碼基因,設計引物探針,在核酸水平上對菌株進行鑒定及分型。該方法操作高效便捷,用時較短,僅數小時即可得出結果,且結果判讀清晰簡單,只要有分子生物學基礎的實驗人員均可使用,對儀器耗材等要求也不高。


同時,一些沙門氏菌由于自凝集及培養狀態無法用血清凝集的方式有效分型[5],而PCR檢測的方式不受細菌狀態的影響,一定程度上彌補了傳統方法的不足,滿足了快速檢測的需求。


目前已有不少研究人員開始嘗試用PCR法進行沙門氏菌血清分型,周燕霞等2019年對33+6株沙門氏菌進行傳統的玻片血清凝集分型和分子血清分型試劑盒兩種方法的對比試驗,結果顯示兩種方法匹配率高達94.9%(37/39)[6]。


MicroFast?沙門氏菌血清型分子鑒定解決方案


第一代產品以12個特異性基因組合以及大數據統計結果為基礎,建立數據庫,進行血清分型。


第二代產品以沙門氏菌特異性血清抗原基因(O/H)為基礎,進行血清分型。


MicroFast?一代沙門氏菌血清型分子鑒定試劑盒數據庫包括128種血清型。

MicroFast?二代沙門氏菌血清(O、H)基因分型數據庫

解決方案涵蓋:


沙門氏菌血清型分子鑒定試劑盒(PCR-探針法)


沙門氏菌血清(O、H)基因分型試劑盒(PCR-探針法)


沙門氏菌單相(二項缺失)鑒定試劑盒(PCR-探針法)


腸炎沙門氏菌鑒定試劑盒(PCR-探針法)


鼠傷寒沙門氏菌鑒定試劑盒(PCR-探針法)


鼠傷寒沙門氏菌/鼠傷寒沙門氏菌單相變種鑒定試劑盒(PCR-探針法)


參考文獻:

[1] Majowicz S E, Jennie M, Elaine S, et al. The Global Burden of Nontyphoidal Salmonella Gastroenteritis[J]. Clinical Infectious Diseases, 2010, 50(6):882.

[2] 王茂起, 冉陸, 王竹天,等. 2001年中國食源性致病菌及其耐藥性主動監測研究[J]. 衛生研究, 2004, 33(1):49-49.

[3] Xia S, Hendriksen R S, Xie Z, et al. Molecular Characterization and Antimicrobial Susceptibility of Salmonella Isolates from Infections in Humans in Henan Province, China[J]. Journal of Clinical Microbiology, 2009, 47(2):401-409.

[4] 楊保偉,申進玲,席美麗,等.2007-2008年西安地區雞肉源沙門氏菌相關特性分析[J].食品科學,2011,32(19):130-136

[5]?胡豫杰,赫英英,王曄茹,劉暢,王美美等. 中國六省份零售整雞中沙門菌血清型分布和耐藥性特征研究.?中華預防醫學雜志.?2018,52(04)

[6] 周燕霞, 蔡雪鳳, 任巖,等.沙門氏菌傳統血清凝集分型和分子血清分型試劑盒方法比較[J]. 食品安全質量檢測學報, 2019, 010(018):6068-6077.